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淺談高效液相色譜法及其與氣相色譜法的區別

作者: 時(shí)間:2013-12-13 來(lái)源:網(wǎng)絡(luò ) 收藏
  高效液相色譜是色譜法的一個(gè)重要分支,以液體為流動(dòng)相,采用高壓輸液系統,將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動(dòng)相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內各成分被分離后,進(jìn)入檢測器進(jìn)行檢測,從而實(shí)現對試樣的分析。

  高效

  特指一種用液體為流動(dòng)相的色譜分離分析方法。它在經(jīng)典色譜理論的基礎上,采用了高壓泵、化學(xué)鍵合固定相高效分離柱、高靈敏專(zhuān)用檢測器等新實(shí)驗技術(shù)建立的一種液相色譜分析法。

  高壓:150-350*105 Pa

  高效:大于30000塔板/米

  高靈敏:10-9g (紫外檢測)、10-11g (熒光檢測)

  液相色譜儀與氣相色譜儀的區別:

  1、分析對象的區別

  GC:適于能氣化、熱穩定性好、且沸點(diǎn)較低的樣品;但對高沸點(diǎn)、揮發(fā)性差、 熱穩定性差、離子型及高聚物的樣品,尤其對大多數生化樣品不可檢測 占有機物的20%

  HPLC:適于溶解后能制成溶液的樣品(包括有機介質(zhì)溶液),不受樣品揮發(fā)性和熱穩定性的限制,對分子量大、難氣化、熱穩定性差的生化樣品及高分子和離子型樣品均可檢測 用途廣泛,占有機物的80%

  2、流動(dòng)相差別的區別

  GC:流動(dòng)相為惰性,氣體組分與流動(dòng)相無(wú)親合作用力,只與固定相有相互作用。

  HPLC:流動(dòng)相為液體,流動(dòng)相與組分間有親合作用力,能提高柱的選擇性、改善分離度,對分離起正向作用。且流動(dòng)相種類(lèi)較多,選擇余地廣,改變流動(dòng)相極性和pH值也對分離起到調控作用,當選用不同比例的兩種或兩種以上液體作為流動(dòng)相也可以增大分離選擇性。

  3、操作條件差別

  GC:加溫操作

  HPLC:室溫;高壓(液體粘度大,峰展寬?。?/P>



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