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單色激發(fā)光源外圍控制電路設計

作者: 時(shí)間:2008-04-25 來(lái)源:網(wǎng)絡(luò ) 收藏
【摘要是單細胞熒光顯微系統中的重要組成部分。本文簡(jiǎn)要介紹了熒光顯微檢測系統中電路的組成,并詳細介紹了電路中自動(dòng)校準電路以及手控板。通過(guò)電路的設計,使得整個(gè)單色激發(fā)光源系統安全,有效,便于操控。
關(guān)鍵字】熒光顯微,手控板,自動(dòng)校準,多級菜單

1.引言

熒光顯微技術(shù)在生物學(xué)和醫學(xué)領(lǐng)域已得到了廣泛應用,是觀(guān)測活細胞與周?chē)h(huán)境之間、細胞內生物大分子之間相互作用的有力工具。隨著(zhù)世界科技發(fā)展不斷深入,尤其是生物、醫學(xué)、納米科技等領(lǐng)域已進(jìn)入分子生物學(xué)、基因醫學(xué)、原子層次的發(fā)展新階段,單個(gè)分子或少許分子的熒光顯微檢測技術(shù)已經(jīng)越來(lái)越引起人們的重視[1]。

由于不同熒光物質(zhì)(生物、生化物質(zhì)或熒光探針)需要不同波長(cháng)的激發(fā)光才能發(fā)射熒光, 所以必須具備能或改變激發(fā)光波長(cháng)的單色激發(fā)光源系統。國際上熒光檢測設備的生產(chǎn)廠(chǎng)商有德國的TILL、日本的奧林巴斯等公司,其相關(guān)產(chǎn)品有德國TILL公司生產(chǎn)的Polychrome系列單色光源系統,以及日本奧林巴斯最新推出的MVX10研究級熒光顯微系統。國內有臺灣明美科技生產(chǎn)的InCyt I/P型鈣離子雙波長(cháng)比值熒光影像及測量系統。他們的單色光源系統大多都采用氙燈作為光源,閃耀光柵作為分光元件,構成波長(cháng)可連續無(wú)級變化的激發(fā)光系統,而拋棄了過(guò)去靠濾光片組來(lái)獲得單色光的方法,實(shí)現了波長(cháng)全程或指定范圍內連續或重復掃描(激發(fā)光無(wú)級變化)、設定波長(cháng)、時(shí)間記錄、設定步長(cháng)、步進(jìn)掃描等功能。我們在自己的單色激發(fā)光源光學(xué)系統已基本成形的基礎上[2],開(kāi)發(fā)了單色光源的電路控制系統。

2.系統總體介紹

單色光源外圍控制電路如圖1所示,由以Cypress公司的USB2.0接口芯片EZ-USB FX2 CY7C68013(以下簡(jiǎn)稱(chēng)FX2)為核心處理器的硬件電路系統組成。整個(gè)系統可以利用PC機的光學(xué)掃描應用程序,通過(guò)USB接口來(lái)控制整個(gè)光學(xué)系統。也可以在無(wú)PC機的情況下,通過(guò)手控板來(lái)控制整個(gè)系統。手控板的微處理機通過(guò)RS232協(xié)議與FX2通訊,通過(guò)手控板的人機界面實(shí)現對整個(gè)單色光源系統的控制。溫度監測電路配合FX2對氙燈光源室的溫度進(jìn)行監測,由FX2控制的數模轉換電路及信號調理電路實(shí)現對光柵掃描定位器的控制功能,有機發(fā)光顯示器(Organic Light Emitting Display,OLED)組成的顯示接口電路作為人機界


面的顯示,光敏電阻監測氙燈的工作狀態(tài),繼電器及其驅動(dòng)電路組成的電源控制電路配合FX2實(shí)現單色激發(fā)光源的各部分電路按照預定程序加電,在系統異常的情況下可以關(guān)閉氙燈和光柵掃描器的電源。模數轉換電路及信號調理電路用于采集光電轉換的數據,完成系統的自動(dòng)校準。

圖1 外圍電路系統結構圖

3.具體設計原理及方案

3.1 自動(dòng)校準電路的設計

對于每一套單色光源系統,即使采用相同的光學(xué)器件,在具體參數上也會(huì )不盡相同。所以對于每一套光學(xué)系統,在使用之初和使用一段時(shí)間之后,必須對系統進(jìn)行校準,以達到精確的測量。自動(dòng)校準電路正是基于此目的,方便用戶(hù)而設計的。

3.1.1自動(dòng)校準的原理

單色光源采用衍射光柵中的閃耀光柵作為分光元件。設計時(shí)選用光柵的一級光譜,由衍射定理可以推導出單色光源輸出波長(cháng)和相關(guān)角度之間的關(guān)系表達式為式(1)[2]

(1)

式中 為輸出波長(cháng);

為光柵刻槽之間的間距;

為光柵背離角度,即入射光線(xiàn)與衍射光線(xiàn)之間的夾角;

為入射光線(xiàn)與衍射光線(xiàn)之間的二等分線(xiàn)距離光柵法線(xiàn)的夾角。

我們設計的單色光源系統保持入射光和反射光的方向不變,即保持二者的夾角β不變,而通過(guò)旋轉光柵來(lái)得到變化的波長(cháng)λ,實(shí)現波長(cháng)的連續調節,并且特定的光柵其刻槽間距也是固定的。因此,衍射輸出波長(cháng)與光柵定位器的輸入電壓(Vi)成線(xiàn)性關(guān)系,用式(2)表示

=k Vi +b (2)

式中,kb是常數。實(shí)驗中我們通過(guò)確定兩個(gè)已知波長(cháng)(如400nm和588nm)對應的輸入電壓,即可求出kb,從而確定在整個(gè)光譜范圍內單色激發(fā)光源系統的輸出波長(cháng)和光柵定位器的輸入電壓之間的函數關(guān)系。

3.1.2 自動(dòng)校準的硬件設計

利用PC機上的光學(xué)掃描應用程序,很方便實(shí)現系統的自動(dòng)校準。當整個(gè)單色光源系統在無(wú)PC機的環(huán)境下運行時(shí),我們采用手控板來(lái)發(fā)送校準命令,用FX2內部集成的增強型8051來(lái)控制整個(gè)校準過(guò)程。首先在光路的輸出端連接上一個(gè)多波段(400nm, 469nm, 588nm)窄帶濾光片和光電倍增管,光電倍增管的輸出電壓通過(guò)放大到-10V~+10V后連接到模數轉換電路模塊[4]。ADC的電路如圖2所示。其中采用的AD7895是ANALOG DEVICE公司生產(chǎn)的12位串行高速ADC,轉換時(shí)間3.8μs,輸入范圍可選,其中AD7895-10輸入范圍為-10V~+10V。通過(guò)電路中的數模轉換模塊發(fā)送-10V~+10V的模擬電壓,對整個(gè)波長(cháng)段進(jìn)行掃描。數模轉換模塊如圖3所示。其中采用的AD5322是12位精度、單電源供電、輸出緩沖為軌-軌的串行數模轉換器。AD7895和AD5322在FX2的控制下,實(shí)現同步的發(fā)送與采集。我們通過(guò)確定兩個(gè)已知波長(cháng)(如400nm和588nm)對應的輸入電壓,通過(guò)公式2即可求出kb。并將這兩個(gè)參數存儲在EEPROM中。

圖2 模數轉換及信號調理電路

圖3 數模轉換及信號調理電路

3.2 手控板的設計

手控板的主要功能是實(shí)現在無(wú)PC機的情況下,實(shí)現對整個(gè)單色光源系統的控制。主要包括選擇單色光源的控制方式(手控板控制,PC機控制,外部控制),發(fā)送自動(dòng)校準命令及發(fā)送波長(cháng)數據等。

3.2.1 硬件設計

在手控板方案上,我們選擇了手控板的微處理機通過(guò)RS232協(xié)議與FX2通訊,由FX2控制將手控板電路發(fā)送的數據“翻譯”為相應的模擬電壓來(lái)控制光柵掃描器。手控板系統的框圖如圖4所示。圖中OLED顯示和鍵盤(pán)掃面電路用于提供與用戶(hù)交互的界面。I2C存儲電路用于存儲用戶(hù)設置的波長(cháng)和其它參數。RS232和電源接口電路用于手控板的微處理器與FX2通訊并為手控板供電。

圖4 手控板系統框圖

圖5手控板菜單結構圖

3.2.2 多級菜單的軟件設計

人機界面的設計是手控板設計中比較復雜的工作,其涉及到多級菜單的編寫(xiě)。根據手控板菜單結構圖(如圖5所示),首先建立一個(gè)結構,并定義一個(gè)結構變量KbdTabStruct。該結構中共有7個(gè)結構元素,分別是6個(gè)字符型變量和1個(gè)指針變量,6個(gè)字符型變量分別為當前及各個(gè)按鍵的索引號,也就是操作的狀態(tài)號,最后1個(gè)指針變量指向需執行函數。這樣就可以做一個(gè)結構數組,在結構數組里為每一個(gè)菜單項編制一個(gè)單獨的函數,并根據菜單的嵌套順序排好本菜單項的索引號,以及本級菜單項的上、下卷動(dòng)的索引號和上、下級菜單的索引號[5]。具體程序如下所述:

typedef struct

{

BYTE KeyStateIndex; //當前狀態(tài)索引號

BYTE KeyF1State; // 按下F1”鍵時(shí)轉向的狀態(tài)索引號

BYTE KeyF2State; // 按下F2”鍵時(shí)轉向的狀態(tài)索引號

BYTE KeyF3State; // 按下F3”鍵時(shí)轉向的狀態(tài)索引號

BYTE KeyF4State; // 按下F4”鍵時(shí)轉向的狀態(tài)索引號

BYTE KeyCancelState; // 按下取消鍵時(shí)轉向的狀態(tài)索引號

void (*CurrentOperate) ( ); // 當前狀態(tài)應該執行的功能操作

} KbdTabStruct;

KbdTabStruct code KeyTab[SIZE_OF_KEYBD_MENU] =

{

{0,1,1,1,1,1,(*Welcome)},

{1,2,3,4,1,1,(*ControlSel)},

{2,5,6,7,2,1,(*ManusCon)},

{3,3,3,3,3,1,(*PCCon)},

{4,4,4,4,4,1,(*ExCon)},

…………

{29,29,29,29,29,11,(*TRITC)},

};

手控板中實(shí)際運用的菜單達29屏,分為5層,采用上面的方法,較好地解決了多層萊單顯示的問(wèn)題。主程序一旦編制完畢則不需要因為菜單的修改而修改,除非要添加新的功能。添加菜單或變量時(shí)只需按照順序向菜單庫或變量庫中加入,刪除或修改菜單也只需對菜單庫中相關(guān)菜單進(jìn)行操作即可。

4.結束語(yǔ)

按照本文的設計,實(shí)現了對單色光源光學(xué)系統的有效控制。本文作者創(chuàng )新點(diǎn):整個(gè)單色光源系統能夠在脫離PC的環(huán)境下,通過(guò)手控板實(shí)現自動(dòng)校準等功能;簡(jiǎn)單實(shí)現且易于維護的多級菜單提供了友好的人機界面,提高了系統的智能化水平。本外圍控制電路經(jīng)過(guò)一定的改進(jìn),配合單色光源光學(xué)系統,可以形成一套完整的單色激發(fā)光源系統,在性能上將完全能夠達到國外同類(lèi)產(chǎn)品的水平,能夠廣泛運用于各種熒光顯微檢測系統中。

參考文獻

[1] 王桂英,王深,徐至展,等.生物單分子光學(xué)探測方法的進(jìn)展[J] .激光生物學(xué)報, 2003,12(3) :174-178。

[2] 周云燕,蘭李,楊志勇,等.熒光測鈣裝置中單色激發(fā)光源的設計和應用[J] .光電工程,2004,7。

[3] 梁銓廷.物理光學(xué).第二版. 北京:機械工業(yè)出版社,1999.159~218。

[4] 王紅玲,胡細東,陳威等. 光子計毅式PMT在熒光檢測系統中的應用[J] .微計算機信息,2005,21-2:144-145。

[5] 陸錚,羅嘉.單片機C語(yǔ)言下LCD多級菜單的一種實(shí)現方法[J] .工礦自動(dòng)化,2006,2。



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