如何得到更高的靈敏度的氣相色譜

　?。?）使用溶劑濃縮的方法（Solvent Focusing）可以在不犧牲分離度的情形下達到很好的靈敏度；

　?。?）選擇合適的色譜柱。氣相色譜往往用來(lái)檢測含量很低的目標化合物，例如濫用藥物做環(huán)境污染物。

　　這是氣相色譜分析人員的一大挑戰。在這里我們提供兩種方法來(lái)解決這個(gè)問(wèn)題。

　　一、溶劑濃縮方法

　　溶劑濃縮的目的是不使用分流進(jìn)樣仍然可以得到尖銳的峰形，因為惟有如此，才能得到很好的靈敏度以及很好的分離度。

　　溶劑濃縮是由兩種方法產(chǎn)生。

　　第一種是當不分流進(jìn)樣時(shí)，液體的樣品揮發(fā)后，在較冷的色譜柱上冷卻凝結。因為載氣的體積比液體大很多，所以當樣品冷凝結時(shí)，樣品就濃縮在色譜柱的一個(gè)小范圍內。

　　第二種是在不分流進(jìn)樣和直接進(jìn)樣時(shí)使用。這種方法需要調節柱溫箱。和前者不同的地方是溶劑和分析化合物必須同時(shí)在進(jìn)樣時(shí)在較冷的色譜柱上冷卻凝結。這些凝結的樣品在色譜柱表面形成“樣品泛濫帶”（flooded zone）。 當溶劑逐漸揮發(fā)時(shí)，樣品泛濫帶的面積就逐漸縮小，“樣品泛濫帶”分析物的濃度就漸漸增加。等到溶劑完全揮發(fā)后，分析物就在很小的柱表面范圍上凝結。

　　所以說(shuō)不論哪種方法，分析物或是溶劑和分析物必須在柱子的小面積上凝結。

　　影響樣品在色譜柱上凝結速度的因素有：

　　色譜柱的初始柱溫，溶劑的揮發(fā)性，還有就是色譜柱固定相的比例。

　　這份資料很詳細的討論到每個(gè)因素對溶劑濃集的影響。同時(shí)討論如何改變初初始柱溫來(lái)獲得尖銳的峰形。

　　在此摘述得到“溶劑濃縮”的重點(diǎn)：

　　色譜柱柱溫的初始溫度基本是最容易也是最快做到的一個(gè)方法，一般說(shuō)來(lái)初始溫度愈低的話(huà)，分析物凝結的愈好。建議初始溫度最好設在比最快出峰的分析物的沸點(diǎn)低攝氏50度左右，而這溫度保持的時(shí)間最好就是非分流的保持時(shí)間。

　　第二個(gè)重要的因素是色譜柱“固定相比例”（Phase Ratio）。愈低的固定相比例，意味著(zhù)越厚的膜厚，膜越厚樣品和溶劑越容易溶解在固定相。要改變此因素，也只能試試不同的柱子。這是當改變初始溫度不可能達到的時(shí)候使用的方法。（下期的氣相講座系列將專(zhuān)門(mén) 介紹“固定相比例”- Phase Ratio）

　　最后一個(gè)可以改變的因素就是樣品本身。當然大部分時(shí)候，樣品本身是沒(méi)法改變的。但是我們可以使用不同的溶劑以增加其效果。例如溶劑的沸點(diǎn)和初始溫度的差別愈大愈好。例如柱溫初始溫度是攝氏30 度時(shí)，樣品使用的溶劑是乙酸乙酯（沸點(diǎn)攝氏77.1 度）會(huì )比使用二氯甲烷溶劑好（沸點(diǎn)攝氏39 度）。

　　二、選擇適當的氣相色譜柱

　　當一個(gè)色譜方法需要達到低檢測限和高靈敏度時(shí)，我們就必須選擇低流失的色譜柱和惰性的程序步驟。柱流失是指一些低分子量的固定相的碎片（質(zhì)譜離子355，281，207，73）。這些低分子量的碎片可能是由于固定相中有不純物或是固定相在高溫時(shí)裂解，最明顯的色譜表現就是基線(xiàn)逐漸向上漂移。

　　此外色譜柱的熔融硅膠表面活性太強，生產(chǎn)過(guò)長(cháng)中需要去活，避免分析物和熔融硅膠發(fā)生二級反應，造成峰型拖尾或樣品吸附（部分樣品損失）。

　　為了避免這兩個(gè)問(wèn)題的存在， Phenomenex提供一種自行交聯(lián)（Engineering SelfCross-Linking ESC）的技術(shù)。 這種特別技術(shù)所得到的氣相色譜柱，不但柱流失非常低，也大大的降低二級反應，一些代表性的這類(lèi)柱子有ZB-1ms， ZB-5MSi， ZB-5ms，。。等等